免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)是一种研究蛋白质间交互作用的生物技术。将靶标蛋白特异性结合到磁珠介质上,然后和目标蛋白混合物孵育,经过洗脱将得到与靶标蛋白结合的蛋白,得到的蛋白可以用SDS-PAGE和Western blot进行验证,也可以结合质谱技术,确定这些蛋白。
BEENbio为研究者提供以下几种备选实验方案:
1 内源性蛋白免疫共沉淀(COIP):研究与已知细胞/组织内表达蛋白相互作用的蛋白
1.1 培养细胞/获取组织
1.2 裂解细胞/提取组织蛋白
1.3 Protein A/G COIP 磁珠与靶标蛋白抗体结合形成磁珠抗体复合物
1.4 磁珠抗体复合物与细胞裂解液/组织裂解液孵育
1.5 Washing 和 Elution
1.6 SDS-PAGE 和western blot 检测
1.7 质谱鉴定
2 外源性蛋白免疫共沉淀(COIP):研究与外转蛋白相互作用的细胞内表达蛋
2.1 培养细胞
2.2 转染质粒
2.3 裂解细胞
2.4 Protein A/G COIP 磁珠与靶标蛋白抗体结合形成磁珠抗体复合物
2.5 磁珠抗体复合物与细胞裂解液/组织裂解液孵育
2.6 Washing 和 Elution
2.7 SDS-PAGE 和western blot 检测
2.8 质谱鉴定