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蛋白免疫共沉淀(CoIP)
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蛋白免疫共沉淀(CoIP)

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  免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)是一种研究蛋白质间交互作用的生物技术将靶标蛋白特异性结合到磁珠介质上,然后和目标蛋白混合物孵育,经过洗脱将得到与靶标蛋白结合的蛋白,得到的蛋白可以用SDS-PAGE和Western blot进行验证,也可以结合质谱技术,确定这些蛋白。

     BEENbio为研究者提供以下几种备选实验方案:

1 内源性蛋白免疫共沉淀(COIP):研究与已知细胞/组织内表达蛋白相互作用的蛋白

1.1 培养细胞/获取组织

1.2 裂解细胞/提取组织蛋白

1.3   Protein A/G COIP 磁珠与靶标蛋白抗体结合形成磁珠抗体复合物

1.4 磁珠抗体复合物与细胞裂解液/组织裂解液孵育

1.5   Washing 和 Elution

1.6   SDS-PAGE 和western blot 检测

1.7 质谱鉴定

2 外源性蛋白免疫共沉淀(COIP):研究与外转蛋白相互作用的细胞内表达蛋

2.1 培养细胞

2.2   转染质粒

2.3 裂解细胞

2.4   Protein A/G COIP 磁珠与靶标蛋白抗体结合形成磁珠抗体复合物

2.5 磁珠抗体复合物与细胞裂解液/组织裂解液孵育

2.6   Washing 和 Elution

2.7   SDS-PAGE 和western blot 检测

2.8 质谱鉴定


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